Hunde:
* Dame: En smuk, renracet Cocker Spaniel, som bliver forkælet og elsket af sine ejere.
* Tramp: En gadevis, rod, der i starten er mistænksom over for mennesker, men som gradvist varmer op til Lady.
* Pålidelig: En klog og loyal blodhund, som er Ladys bedste ven.
* Jock: En kæphøj og energisk skotsk terrier, som er Ladys anden ven.
* Buster: En gnaven og territorial Bull Terrier, som er Jocks ven.
* Peg: En sød og fræk pekingeser, der bliver ven med Lady, mens hun er alene.
* Tyr: En hård og krævende Bulldog, som er Pegs kæreste.
* Siameserkatte: To drilske siameserkatte, der er en konstant kilde til problemer for Lady.
Mennesker:
* Kære Jim: Damens kærlige ejer.
* Kære: Damens kærlige ejer.
* Tante Sarah: Jim Dear og Darlings tante, der kommer på besøg og bringer sin irriterende, forkælede lille terrier, "babyen".
* Udbringeren: En venlig mand, der føder barnet.
Andre dyr:
* Boris: En gnaven, gammel kat, der bor sammen med Peg og Bull.
* Rotten: En stor rotte, som Tramp bekæmper i gyden.
* Hesten: Hesten, der trækker vognen under spaghettiscenen.
Denne liste omfatter hovedpersonerne, men der er også flere mindre karakterer, der optræder i hele filmen.