Skull and crossbones-symbolet er blevet brugt af militære enheder i århundreder at betyde fare og død. I tilfældet med Rough Riders-flaget repræsenterede kraniet og korsknoglerne også regimentets motto:"We Ride or We Die." Farven rød blev valgt til flaget, fordi det er farven på blod og krigsførelse.
Rough Riders-flaget er et symbol på mod, beslutsomhed og opofrelse. Det repræsenterer de modige mænd, der kæmpede i den spansk-amerikanske krig og var med til at gøre Amerika til en stor nation. Flaget er også en påmindelse om vigtigheden af frihed og demokrati, og de ofre, der er blevet gjort for at beskytte disse idealer.