Lady Macbeth: Macbeths kone og medsammensvoren. Hun er en hensynsløs og ambitiøs kvinde, der får Macbeth til at dræbe kong Duncan. Efter mordet bliver Lady Macbeth ramt af skyld og anger, og hun dør til sidst i en tilstand af vanvid.
Kong Duncan: Kongen af Skotland i begyndelsen af stykket. Han er en venlig og velvillig hersker, og hans mord af Macbeth sætter gang i historiens tragiske begivenheder.
Bank: En medgeneral og nær ven af Macbeth. Han har mistanke om Macbeths involvering i kong Duncans mord, og han bliver til sidst et offer for Macbeths paranoia.
De tre hekse: Tre overnaturlige skikkelser, der profeterer, at Macbeth vil blive konge. Deres profetier sætter gang i stykkets begivenheder, og de bruges som et symbol på skæbnen og konsekvenserne af ambitioner.
Macduff: En skotsk adelsmand, der modsætter sig Macbeths styre og til sidst leder de styrker, der vælter ham.
Malcolm og Donalbain: Kong Duncans sønner. Malcolm flygter til England efter sin fars mord og vender til sidst tilbage til Skotland for at lede en hær mod Macbeth. Donalbain flygter også fra Skotland efter mordet, men spiller ikke en væsentlig rolle i resten af stykket.
Hecate: Heksekunstens og magiens gudinde. Hun optræder i stykkets tredje akt og befaler heksene at gøre hendes bud.