Deres forhold til Hamlet er komplekst og mangefacetteret:
* Oprindeligt præsenteres de som neutrale partier: Kongen beder dem om at "bruge deres skøn" og finde ud af, hvad der gør Hamlet så melankolsk. De ser ud til at opfylde en pligt snarere end at have nogen ondskab mod Hamlet.
* de bliver sammenfiltret i Claudius 'plot: Kongen instruerer dem om at tage Hamlet til England og få ham henrettet. Dette sætter dem i en vanskelig position, da de nu er aktivt involveret i potentielt skadelige handlinger.
* deres loyalitet er tvivlsom: Deres vilje til at følge kongens ordrer rejser spørgsmål om deres loyalitet til Hamlet, deres gamle ven. Det er uklart, om de virkelig er bekymrede for Hamlets velbefindende eller blot forsøger at behage kongen.
* De fungerer som folier til Hamlet: Deres manglende dybde og kompleksitet står i kontrast til Hamlets dybe introspektion og filosofiske mønstre. De repræsenterer det verdslige og praktiske, mens Hamlet legemliggør den tragiske og filosofiske.
* de er i sidste ende ofre for skuespillets centrale konflikt: Deres lydighed mod Claudius fører til deres egen tragiske ende, da de dræbes af piraterne, som Hamlet ansætter for at aflytte dem.
Sammenfattende er Rosencrantz og Guildenstern tvetydige karakterer, der tjener flere formål i stykket:
* De giver komisk lettelse og kontrast til Hamlets alvor.
* De fungerer som instrumenter fra kongens bearbejdninger.
* de fremhæver kompleksiteten af loyalitet og moral i stykket.
Uklarheden omkring deres sande intentioner og deres ultimative skæbne tjener til at understrege tragedien i Hamlet og de moralske kompleksiteter i stykket.