Form og størrelse: Globe Theatre var en stor, cirkulær træbygning med en diameter på cirka 100 fod. Det kunne rumme op til 3.000 tilskuere, hvilket gør det til et af de største teatre i det Elizabethanske London.
Siddepladser i tre niveauer: Globe Theatre havde et tre-trins siddearrangement. Grundene stod i det nederste lag, som blev kaldt "gården" eller "graven". Det midterste lag, kendt som "gallerierne" eller "stilladserne", var opdelt i individuelle siddepladser til betalende kunder. Det højeste niveau, kaldet "himlen" eller "hytterne", var dækket af et stråtag og blev brugt til altanscener eller til at huse musikere.
Scene og belysning: Scenen var en hævet platform, der projicerede ind i publikum. Det havde intet gardin, og skuespillere kom ind og ud gennem døre på begge sider. Globe Theatre havde ikke elektrisk belysning, så forestillinger var afhængige af naturligt dagslys. I dårligt vejr kan teatret have brugt stearinlys eller fakler til at give yderligere belysning.
Publikum og social struktur: Globe Theatre tiltrak et mangfoldigt publikum, lige fra adelige og velhavende købmænd til almue og lærlinge. Det sociale hierarki blev afspejlet i siddearrangementerne, hvor de øverste lag blev besat af de højere sociale klasser, og jordbefolkningen blev befolket af de lavere klasser.
Alsidighed og fleksibilitet: Globe Teatrets fleksible scene og enkle design gav mulighed for stor alsidighed i opsætningen af skuespil. Shakespeares skuespil blev ofte fremført på en række forskellige måder, idet de gjorde brug af forskellige niveauer af scenen og inkorporerede musik, dans og specialeffekter.
Akustiske egenskaber: Globe Theatre blev designet med fremragende akustiske egenskaber, der sikrede, at skuespillernes stemmer kunne høres tydeligt i hele teatret. Den cirkulære form og de tre-trins siddepladser var med til at forstærke lyden og minimere ekkoer.
Overordnet set var Globe Theatre en bemærkelsesværdig og ikonisk struktur, der eksemplificerede den pulserende teaterkultur i Elizabethan England og spillede en afgørende rolle i udviklingen af Shakespeares skuespil og den engelske teatertradition.