Disse overtoner er det, der giver hvert musikinstrument dets unikke klang- eller tonefarve. For eksempel kan et klaver og en guitar spille den samme tone i samme tonehøjde, men de vil lyde forskelligt på grund af de forskellige overtoner, der er til stede.
Antallet og relative styrker af overtonerne i en lyd bestemmes af formen, størrelsen og materialet af det vibrerende objekt. For eksempel vil et strengeinstrument som en guitar eller violin have et andet sæt overtoner end et blæseinstrument som en fløjte eller klarinet.
Studiet af overtoner kaldes harmonik . Overtoner spiller en vigtig rolle i musikteori, komposition og performance.